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BNCC菌種測序名錄-中昌國研標(biāo)物
點(diǎn)擊次數(shù):2185 更新時(shí)間:2019-12-30

BNCC菌種測序名錄-中昌國研標(biāo)物

細(xì)胞分選技術(shù)有新突破啦!

細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個(gè)生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程,細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。但在細(xì)胞培養(yǎng)過程中也難免遇到這樣那樣的問題,就比如常見的細(xì)胞密度不均勻問題就很令人頭疼,那又該怎么辦呢?

下面便是小編為大家整理的幾點(diǎn)關(guān)于細(xì)胞分布不均的實(shí)用經(jīng)驗(yàn):

1、盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞,DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時(shí)間。

2、96孔板一般以100 微升每孔接種,直接用100 微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開一點(diǎn)孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需*打到大,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。

3、6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個(gè)孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個(gè)孔底都是濕潤的,細(xì)胞懸液會平鋪在整個(gè)孔底,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。

4、培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后),先順時(shí)針搖晃3次,馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。

 

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